小儿感冒颗粒绿原酸、木犀草苷、连翘酯苷A的含量测定和指纹图谱方法

发布时间:2023-03-14

【指纹图谱】 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)测定。

色谱条件与系统适应性试验 以Waters BEH C18 (100mm×2.1mm,1.7μm)为色谱柱;以乙腈为流动相A,0.2%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;多波长切换,0~10分钟为330nm,10~12分钟为275nm,12~30分钟为330nm,30~40分钟为202nm;柱温为30;流速为每分钟0.3ml。理论踏板数按连翘酯苷A计,不得低于10000。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0~15

5→12

95→88

15~35

12→25

88→75

35~40

25→100

75→0

对照品溶液的制备  取绿原酸、对羟基苯乙酮、木犀草苷、连翘酯苷A、毛蕊花糖苷、3, 5-O-二咖啡酰基奎宁酸、异绿原酸C、连翘苷对照品适量,加70%甲醇制成每1ml分别含10μg的混合溶液,即得。

供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品,研细,取约2g,精密称定,置具塞三角锥形瓶中,精密加入70%甲醇20ml,称定重量,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。取续滤液,即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2µl,注入液相色谱仪,测定,即得。

供试品指纹图谱中应分别呈现与参照物色谱峰保留时间相对应的色谱峰,并应出现15个共有峰。以15个共有峰为标记,按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算,供试品指纹图谱与对照指纹图谱相似度应不得低于0.80。

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小儿感冒颗粒对照指纹图谱

峰2:绿原酸  峰4:对羟基苯乙酮  峰7:木犀草苷  峰9:连翘酯苷A  峰10:毛蕊花糖苷 

峰11:3, 5-O-二咖啡酰基奎宁酸  峰13:异绿原酸C  峰14:连翘苷

 

【含量测定】  照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验  同【指纹图谱

对照品溶液的制备  取绿原酸对照品、木犀草苷对照品、连翘酯苷A对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加70%甲醇分别制成每lml含绿原酸10µg,木犀草苷5µg,连翘酯苷A 40µg的混合对照品溶液,即得。

供试品溶液的制备  同【指纹图谱

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2µl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品每1g小儿感冒颗粒中,含菊花以绿原酸(C16H18O9)计,不得少于33.5μg,以木犀草苷(C21H20O11)计,不得少于14.0μg;含连翘以连翘酯苷A(C29H36O15)计,不得少于70.0μg。