【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以0.05%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长:205nm。理论板数按穿心莲内酯峰计算应不低于8000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~10 | 10→20 | 90→80 |
10~13 | 20 | 80 |
13~25 | 20→35 | 80→65 |
25~30 | 35→50 | 65→50 |
30~32 | 50 | 50 |
30~32 | 50→80 | 50→20 |
32~33 | 80 | 20 |
对照品溶液的制备 取对照品溶液的制备:取穿心莲内酯对照品、新穿心莲内酯对照品、14-去氧穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含1ml穿心莲内酯0.30mg、新穿心莲内酯0.08mg、14-去氧穿心莲内酯0.07mg、脱水穿心莲内酯0.19mg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取约0.3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,称定重量,超声处理30分钟,取出放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl,注入液相色谱仪,记录色谱图。
本品每片含穿心莲以穿心莲内酯(C20H30O5)、新穿心莲内酯(C26H40O8)、14-去氧穿心莲内酯(C20H30O4)和脱水穿心莲内酯(C20H28O4)的总量计,小片和糖衣片不得少于8.3mg,大片不得少于16.6mg。