取本品0.5g至具塞锥形瓶中,加70%甲醇25ml,超声处理(功率500W,频率40kHz)30分钟,放冷,滤过,取续滤液作为供试品溶液。另取白花前胡甲素对照品,用甲醇制成每1ml含4µg的溶液,作为对照品溶液。照高效液相色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0512)试验,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,0.1%磷酸水溶液为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为330nm。吸取上述两种溶液各5µ1,分别注入液相色谱仪,测定。供试品色谱中应呈现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~31 | 7.5 | 92.5 |
31~35 | 7.5→20 | 92.5→80 |
35~60 | 20 | 80 |
60~70 | 20→90 | 80→10 |
70~75 | 90 | 10 |