色谱条件与系统适用性试验 采用月旭Xtimate-C18色谱柱(4.6×250mm，5μm)，以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸为流动相B，按下表进行梯度洗脱梯，流速为1ml/min，柱温30℃，检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备 分别取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每l ml含芦荟大黄素10µg、大黄酸8µg 、大黄素8µg、大黄酚40µg，大黄素甲醚10µg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品重量差异项下大蜜丸，剪碎，取2g，精密称定；或取水蜜丸或水丸，研细，取1g，精密称定，置具塞三角锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，加热回流45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含游离蒽醌以芦荟大黄素（C₁₅H₁₀O₅）、大黄酸（C₁₅H₈O₆）、大黄素（C₁₅H₁₀O₅）、大黄酚（C₁₅H₁₀O₄）、大黄素甲醚（C₁₆H₁₂O₅）的总量计；大蜜丸每1g不得少于0.28mg，水蜜丸不得少于0.55mg；水丸不得少于0.79mg。