清热解毒口服液和清热解毒颗粒剂多指标特征成分检验方法

发布时间:2023-03-14

一、仪器与试药:

仪器:Waters e2695 高效液相色谱仪(2998 PDA-2424 ELSD检测器)

试药:甲醇和甲酸为色谱纯;水为纯化水;其它试剂均为分析纯。

对照品:哈巴俄苷、黄芩苷、连翘酯苷A 、龙胆苦苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、栀子苷、知母皂苷BⅡ(批号:111730-202110、110715-202122、111810-202108、110770-202219、111894-202205、110739-201919,111839-202107,含量:96.8%、94.2%、96.2%、98.1%、94.9%、97.1%、95.4%),均购于中国食品药品检定研究院。

二、试验方法

色谱条件:Waters e2695 高效液相色谱仪(2998 PDA-2424 ELSD检测器),以 Diomonsil Plus C18(4.6mm*250mm, 5μm)为色谱柱,以甲醇(A)-0.4%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1mL/min,柱温35℃,进样量 10μL,检测波长为238nm、280nm(29分钟238nm切换至280nm),ELSD 漂移管温度85℃,载气压力40 psi。梯度洗脱程序见表1。

表1 色谱梯度程序

时间(min)

流动相A%-甲醇

流动相B%-0.4%甲酸水

0

22

78

16

22

78

40

36

64

62

56

44

85

80

20

90

80

20

供试品溶液制备:精密量取本品口服液1mL,置5mL量瓶中,加70%甲醇至刻度,摇匀,即得;或取颗粒剂1袋,研细,取约1g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入70%甲醇10mL,称定重量,超声处理(功率160W,频率50kHz)30分钟,放冷,再用70%甲醇稀补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

对照品溶液配制:取黄芩苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、栀子苷、龙胆苦苷、连翘酯苷A、哈巴俄苷、知母皂苷BⅡ对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成含黄芩苷170µg、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸50µg、栀子苷110µg、龙胆苦苷100µg、连翘酯苷A100µg、哈巴俄苷50µg、知母皂苷BⅡ0.5mg的混合对照溶液。

结果判定:各组分应不得少于以下相应拟定限度:

成分

口服液拟定限度(mg/g

颗粒剂拟定限度(mg/g)

哈巴俄苷

0.020

0.067

黄芩苷

1.0

3.6

连翘酯苷A

0.016

0.47

龙胆苦苷

0.20

0.33

4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸

0.1

0.62

栀子苷

0.24

0.73

知母皂苷B

0.32

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