根据《中国药典》2020年版四部通则9101“分析方法验证指导原则”的有关要求，对该检测方法进行提取效率、准确度、重复性、专属性、定量限、线性、耐用性、范围考察。

1.仪器与试药

仪器：Waters e2695 高效液相色谱仪（2998 PDA检测器）

试药：甲醇和甲酸为色谱纯；水为纯化水；其它试剂均为分析纯。

对照品：栀子苷、黄芩苷（批号：110739-201919、110715-202122，含量：97.1%、94.0%），均购于中国食品药品检定研究院。

药材：栀子、黄芩药材由亳州药材市场收集，经苏州市卫生职业技术学院刘逊副主任中药师鉴定为正品。

2.方法与结果

2.1方法

色谱条件：Waters e2695 高效液相色谱仪（2998 PDA检测器），以 Diomonsil Plus C18（4.6mm*250mm, 5μm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.4%甲酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，流速1mL/min，柱温35℃，进样量 10μL，检测波长为254nm。梯度洗脱程序见表1。

表1梯度洗脱程序

供试品溶液制备：精密量取本品1mL，置5mL量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，即得。

对照品溶液配制：取黄芩苷、栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成含黄芩苷、栀子苷各100µg的混合对照溶液。

结果判定

栀子苷限度不得低于0.36mg/mL，黄芩苷不得低于0.60mg/mL。