按《中国药典》（2020年版）四部9101分析方法指导原则进行分析方法学验证。对该检测方法进行专属性、检测限及耐用性进行考察，

仪器： SCIEX 5500+QTRAP液质联用仪（SCIEX公司）。

色谱条件：色谱柱为Waters Acquity BEH-C18（1.7μm，100×2.1mm），柱温35℃，流动相为乙腈-0.1%乙酸水，流速0.3ml/min，按下表规定进行梯度洗脱，进样体积1μl。

表1 梯度洗脱程序

质谱条件：离子化模式为ESI-，多反应离子监测，选择地黄苷D特征离子峰m/z 685.1→263.0和m/z685.1→179.0作为监测离子对，去簇电压为-80，碰撞能量分别为-28和-38，（R,S）-吿依春特征离子峰m/z128.0→58.0和m/z128.0→72.0作为检测离子对，去簇电压为-24，碰撞能量分别为-20和-21；毛细管电压-4500V，干燥气温度500℃，Gas1 50，Gas2 50，Curtain Gas 35，Collision Gas 9。

对照品：地黄苷D，批号112063-202102，纯度96.9%，（R,S）-吿依春，批号111753-202007，纯度100%，均购自中国食品药品检定研究院。

试剂：甲醇、乙酸为色谱纯，乙腈为LC-MS级。

对照品溶液制备：称取地黄苷D和（R,S）-吿依春对照品10mg，分别置10ml量瓶，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作对照品储备溶液，用50%甲醇稀释制成每ml含100ng的对照品混合溶液。

供试品制备：口服液及注射液，取本品1ml，置10ml量瓶中，用50%甲醇溶液稀释定容到刻度，摇匀后滤过，取续滤液作为供试品溶液；颗粒剂取5袋内容物，研细，取1g，精密称定，置10ml量瓶中，加适量50%甲醇，超声处理30分钟，放冷，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作供试品溶液。

结果判定

供试品溶液色谱检出与对照品溶液色谱保留时间相同的色谱峰，所选择的2个监测离子对均出现，且所选的检测离子对峰面积比与对照品的监测离子对峰面积比一致（相对比例＞50%，允许±20%偏差；相对比例＞20%～50%，允许±25%偏差；相对比例＞10%～20%，允许±30%偏差；相对比例≤10%，允许±50%偏差；），可判定检出。