清热解毒口服液中甜菊糖苷LC-MSMS检测法

发布时间:2023-03-14

【检查】甜菊糖苷

色谱条件:岛津LC-8050MS液相串联质谱仪,色谱柱:Waters Acquity(2.1×100 mm,1.8μm),流动相为有机相(甲醇﹕乙腈=1﹕1)和水相(0.01%甲酸的5mM乙酸铵水溶液),梯度洗脱见表1。流速为0.3 mL·min-1,柱温为38 ,离子模式:负离子;母离子803.20m/z,子离子641.25m/z,驻留时间30.0msec,CE:25.0v。

表1  甜菊糖苷液质测定液相梯度洗脱程序

时间min

水相%

有机相%

0

95

5

1.5

95

5

1.6

80

20

5.0

80

20

5.1

60

40

10.0

60

40

10.5

45

55

18.0

50

50

18.5

10

90

20.0

10

90

21.0

95

5

28.0

95

5

供试品制备:精密量取清热解毒口服液1 mL,加水稀释并定容至100 mL,0.45 μm滤膜滤过,即得。

对照品:甜菊糖苷(来源:Nature Standard,批号:7821,纯度:98.0%)

标准曲线:精密量取甜菊糖苷对照品适量,置于100mL容量瓶中,加甲醇-水(1﹕1)适量使溶解,定容至刻度,制成每1mL约含200μg 的溶液,摇匀,即得。分别精密吸取上述标准储备溶液适量,制成浓度分别为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL和50μg/mL标准系列工作溶液,注人液质联用仪,测定峰面积,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线。

结果判定:参照GB2760饮料类国标,甜菊糖苷最大使用量(以甜菊醇当量计)为0.2g/kg(mg/g)。查阅文献发现,甜菊糖苷与甜菊醇的换算关系为甜菊糖苷相当于甜菊醇当量的倍数为0.395。检验结果经换算后,与GB2760饮料类国标限度进行比较,进行结果判定。