【检查】苯甲酸、糖精钠、安赛蜜
色谱条件:高效液相色谱仪配DAD检测器,色谱柱:Waters XBridge Shield RP18(4.6×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-20mM乙酸铵水,梯度洗脱见表1。流速为0.8 mL·min-1,柱温为35 ℃。DAD检测器:检测波长230 nm,同时开启全波长检测。
表1 苯甲酸、糖精钠及安赛蜜测定液相梯度洗脱程序
时间min | 20mM乙酸铵水% | 甲醇% |
0 | 96 | 4 |
5 | 96 | 4 |
10 | 90 | 10 |
20 | 50 | 50 |
35 | 10 | 90 |
40 | 96 | 4 |
45 | 96 | 4 |
供试品制备:精密量取清热解毒口服液1 mL,加水稀释并定容至5 mL,0.45 μm滤膜滤过,即得。
对照品:苯甲酸(来源:中国食品药品检定研究院,批号:201703,纯度:99.9%)、糖精钠(来源:上海安谱璀世标准技术服务有限公司,批号:2105052,纯度:99.9%)、安赛蜜(来源:上海诗丹德标准技术服务有限公司,批号:9574,纯度:100.0%)。
精密量取苯甲酸对照品适量,置于100mL容量瓶中,加水适量使溶解,定容至刻度,制成每1mL含1.26 mg 的溶液,对半稀释,配成系列浓度的对照品溶液。按上述色谱条件分别进样进行测定,数据以各对照品的峰面积(Y)对其质量浓度(X,mg)绘制标准曲线,计算回归方程y=710.22x+10.203、线性范围0.02~1.26mg/mL及相关系数r=0.9999。
精密量取糖精钠对照品适量,置于100mL容量瓶中,加水适量使溶解,定容至刻度,制成每1mL含0.75 mg 的溶液,对半稀释,配成系列浓度的对照品溶液。按上述色谱条件分别进样进行测定,数据以各对照品的峰面积(Y)对其质量浓度(X,mg)绘制标准曲线,计算回归方程y=531.82x+1.9941、线性范围0.001~0.75mg/mL及相关系数r=0.9999。
精密量取安赛蜜对照品适量,置于100mL容量瓶中,加水适量使溶解,定容至刻度,制成每1mL含0.53 mg 的溶液,对半稀释,配成系列浓度的对照品溶液。按上述色谱条件分别进样进行测定,数据以各对照品的峰面积(Y)对其质量浓度(X,mg)绘制标准曲线,计算回归方程y=638.3x+1.8806、线性范围0.001~0.53mg/mL及相关系数r=0.9999。
结果判定:根据《中国药典》2020年版四部制剂通则0181 合剂项下规定苯甲酸用量不得超过0.3%。参照GB2760饮料类国标,糖精钠最大使用量以糖精计最大使用量为0.15g/kg(mg/g),安赛蜜为0.3g/kg(mg/g)。