【含量测定】 照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1%乙酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为450nm。理论板数按胆红素峰计算应不低于5000。
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~35 | 40→8 | 60→92 |
35~50 | 8→5 | 92→95 |
50~51 | 5→40 | 95→60 |
51~60 | 40 | 60 |
对照品溶液的制备 取胆红素对照品适量,精密称定,加二氯甲烷制成每1ml含50µg的溶液,即得。
供试品溶液的制备水蜜丸粉碎,取约5g,精密称量,或取大蜜丸1粒,精密称量,加入约等量的硅藻土,精密称量,研匀,取混合粉末5g,置具塞锥形瓶中,加入10%草酸溶液10ml,密塞,涡旋混合,加入水饱和二氯甲烷100ml,冰浴超声处理40分钟,分取二氯甲烷液,低温蒸干,残渣加二氯甲烷溶解,置10ml容量瓶中,用二氯甲烷稀释至刻度,滤过,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液10µl与供试品溶液20µl,注入液相色谱仪,测定,即得。