照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验 采用CORTECS T3 C18色谱柱(2.1×100mm，1.6μm)，以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸为流动相B，梯度洗脱，流速为0.35ml/min，柱温30℃，检测波长：黄芩苷、黄芩素、千层纸素A-7-O-β-D-葡糖糖醛酸苷、千层纸素A、汉黄芩素、汉黄芩苷、脱水穿心莲内酯、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷为254nm，绿原酸、隐绿原酸为327nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于10000。
梯度洗脱表
时间min | A（乙腈） | B（0.1%磷酸） |
0~25 | 5→19 | 95→81 |
25~33 | 19→19 | 81→81 |
33~38 | 19→25 | 81→75 |
38~39 | 25→26 | 75→74 |
39~47 | 26→30 | 74→70 |
47~52 | 30→30 | 70→70 |
52~53 | 30→90 | 70→10 |
53~60 | 90→90 | 10→10 |
对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷、黄芩素、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、千层纸素A、汉黄芩素、汉黄芩苷、脱水穿心莲内酯、隐绿原酸、绿原酸、升麻素苷以及5-O-甲基维斯阿米醇苷适量，加甲醇制成每1ml含黄芩苷0.3mg，黄芩素、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、脱水穿心莲内酯、隐绿原酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷各0.02mg，千层纸素A、汉黄芩素、绿原酸各0.007mg，汉黄芩苷0.07mg的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 取供试品适量，研细，精密称取0.35g，置锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，超声30min，放冷，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μl，注入超高效液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A，6种成分的总量计，不得少于6.10mg/片；每片含防风以升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷2种成分的总量计，不得少于0.24mg/片；每片含穿心莲以脱水穿心莲计，不得少于0.40mg/片；含广藿香、穿心莲及苍耳子以绿原酸和隐绿原酸之和计，不得少于0.30mg/片。
