【检查】山麦冬 照高效液相色谱法(《中国药典》2020年版通则 0512)和质谱法(《中国药典》2020年版通则 0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径2.1mm);以乙腈-0.1%甲酸溶液(50∶50)为流动相,进行等度洗脱,流速为每分钟0.3ml;采用质谱检测器,电喷雾正离子(ESI+),平行反应监测(PRM),按下表质荷比(m/z)的离子对进行检测。
序号 | 名称 | 母离子(m/z) | 子离子(m/z) | CE |
1 | 山麦冬皂苷B | 723.43 | 251.18 | 50 |
269.19 | 50 | |||
2 | 短葶山麦冬皂苷C | 871.47 | 251.18 | 50 |
269.19 | 50 | |||
287.20 | 50 |
对照品溶液的制备 取山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含山麦冬皂苷B10μg、短葶山麦冬皂苷C10μg的混合溶液,即得。
10%掺伪溶液的制备 在处方量麦冬中相应掺入10%比例的湖北麦冬和短葶山麦冬,同供试品溶液制备方法制备,即得。
供试品溶液的制备 取本品水蜜丸6g或小蜜丸9g,研细,或大蜜丸9g,剪碎,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,用甲醇补足减失的重量,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各3μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
结果判定 供试品的提取离子流色谱中,应不得检出与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照品色谱相应的色谱峰。
结果判定原则:(1)供试品的提取离子流色谱中,未出现与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照品溶液色谱相应的色谱峰,视为未检出;(2)供试品的提取离子流色谱中,出现与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照品溶液色谱相应的色谱峰,且供试品中m/z 723.43→251.18色谱峰面积值或m/z 871.47→251.18色谱峰面积值不大于10%掺伪样品溶液中相应的峰面积值者,视为未检出;(3)供试品的提取离子流色谱中,出现与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照品溶液色谱相应的色谱峰,且供试品中m/z 723.43→251.18色谱峰面积值或m/z 871.47→251.18色谱峰面积值大于10%掺伪样品溶液中相应的峰面积值者,视为检出。