冠脉宁制剂高效液相特征图谱测定方法

发布时间:2023-03-14

【特征图谱】  照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0521)测定

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,甲醇为流动相B,0.1%磷酸溶液为流动相C,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为340nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于5000。

 时间(分钟)

 流动相A(%)

流动相B(%)

流动相C(%)

0~12

1→5

15

84→80

12~25

5→12

15

80→73

25~31

12→19

15

73→66

31~45

19

5

66

45~65

19→85

15

0

参照物溶液的制备  取丹参对照药材0.l5g、葛根对照药材0.15g、制何首乌对照药材0.1g、醋延胡索对照药材0.06g,血竭对照药材0.04g,乳香对照药材0.04g,天然没药对照药材0.04g,照含量测定项下供试品溶液制备方法进行制备,制成参照物溶液。

对照品溶液的制备  取3’-羟基葛根素对照品、葛根素对照品、3-甲氧基葛根素对照品、葛根芹菜糖苷对照品、大豆苷对照品、2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品、迷迭香酸对照品、丹酚酸B对照品适量,精密称定,分别加50%甲醇制成每1ml含3-羟基葛根素40μg、葛根素90μg、3-甲氧基葛根素50μg、葛根芹菜糖苷50μg、大豆苷25μg、2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷15μg、迷迭香酸10μg和丹酚酸B 45μg的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备  取〔含量测定〕项下供试品溶液即可。

测定法  分别精密吸取参照物溶液、对照品溶液和供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,即得。

供试品色谱中应呈现与对照特征图谱相对应的16个主要色谱特征峰,其保留时间应与参照物色谱中16个主要色谱风暴刘时间相对应;其中1、3、4、5、7、9、10、11号色谱峰应与3/-羟基葛根素、葛根素、3/-甲氧基葛根素、葛根芹菜糖苷、大豆苷、2,3,5,4/-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、迷迭香酸、丹酚酸B对照品色谱峰保留时间相对应。

1.jpg


   对照特征图谱

(注:16个特征峰,峰1:3-羟基葛根素;峰3:葛根素;峰4:3-甲氧基葛根素;峰5:葛根芹菜糖苷;峰7:大豆苷;峰9:2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷;峰10:迷迭香酸;峰11:丹酚酸B)