【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,甲醇为流动相B,0.1%磷酸溶液为流动相C,按下表中的规定进行梯度洗脱;丹参素钠、3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根芹菜糖苷、大豆苷、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、丹酚酸B检测波长为286nm,血竭素检测波长为420nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于5000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) | 流动相C(%) |
0~12 | 1→5 | 15 | 84→80 |
12~25 | 5→12 | 15 | 80→73 |
25~31 | 12→19 | 15 | 73→66 |
31~45 | 19 | 5 | 66 |
45~65 | 19→85 | 15 | 0 |
对照品溶液的制备 分别取丹参素钠对照品、3’-羟基葛根素对照品、葛根素对照品、3/-甲氧基葛根素对照品、葛根芹菜糖苷对照品、大豆苷对照品、丹酚酸B对照品、血竭素高氯酸盐对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含丹参素钠25μg、3’-羟基葛根素40μg、葛根素90μg、3’-甲氧基葛根素50μg、葛根芹菜糖苷50μg、大豆苷25μg、丹酚酸B 50μg和血竭素5μg的混合对照品溶液。(血竭素的重量=血竭素高氯酸盐重量/1.377)
供试品溶液的制备 取本品20片,除去包衣,或取装量差异项下的本品内容物,精密称定,研细,取约0.5g,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇溶液25ml,称定重量,超声处理(功率320w,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品含丹参以丹参素钠(C9H9O5Na)和丹酚酸B(C36H30O16)的总量计,不得少于0.70mg;含葛根以3’-羟基葛根素(C21H20O10)、葛根素(C21H20O9)、3’-甲氧基葛根素(C22H22O10)、葛根芹菜糖苷(C26H28O13)、大豆苷(C21H20O9)的总量计,不得少于4.0mg;含血竭以血竭素(C17H14O3)计,不得少于50μg。