冠脉宁制剂高效液相含量测定方法

发布时间:2023-03-14

【含量测定】  照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,甲醇为流动相B,0.1%磷酸溶液为流动相C,按下表中的规定进行梯度洗脱;丹参素钠、3-羟基葛根素、葛根素、3-甲氧基葛根素、葛根芹菜糖苷、大豆苷、2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、丹酚酸B检测波长为286nm,血竭素检测波长为420nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于5000。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

流动相C(%)

0~12

1→5

15

84→80

12~25

5→12

15

80→73

25~31

12→19

15

73→66

31~45

19

5

66

45~65

19→85

15

0

对照品溶液的制备    分别取丹参素钠对照品、3-羟基葛根素对照品、葛根素对照品、3/-甲氧基葛根素对照品、葛根芹菜糖苷对照品、大豆苷对照品、丹酚酸B对照品、血竭素高氯酸盐对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含丹参素钠25μg、3-羟基葛根素40μg、葛根素90μg、3-甲氧基葛根素50μg、葛根芹菜糖苷50μg、大豆苷25μg、丹酚酸B 50μg和血竭素5μg的混合对照品溶液。(血竭素的重量=血竭素高氯酸盐重量/1.377)

供试品溶液的制备  取本品20片,除去包衣,或取装量差异项下的本品内容物,精密称定,研细,取约0.5g,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇溶液25ml,称定重量,超声处理(功率320w,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法  精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品含丹参以丹参素钠(C9H9O5Na)丹酚酸B(C36H30O16)的总量,不得少于0.70mg;含葛根以3-羟基葛根素(C21H20O10)、葛根素(C21H20O9)、3-甲氧基葛根素(C22H22O10)、葛根芹菜糖苷(C26H28O13)、大豆苷(C21H20O9)的总量计,不得少于4.0mg;含血竭以血竭素(C17H14O3)计,不得少于50μg。