照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B;检测波长为220nm。理论板数按蛇床子素峰计算应不低于5000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~10 | 5→20 | 95→80 |
10~40 | 20→70 | 80→30 |
40~50 | 70→95 | 30→5 |
50~60 | 95 | 5 |
60~62 | 95→5 | 5→95 |
70 | 5 | 95 |
参照物溶液的制备 取龙胆苦苷、芍药苷、血竭素高氯酸盐、蛇床子素、11-羰基-β-乙酰乳香酸对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品4粒的内容物,置具塞锥形瓶中,精密加入75%乙醇20ml,称定重量,超声处理(功率200W,频率40kHz)30分钟,放冷,用75%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,记录色谱图,在5~65分钟范围内积分,即得。
对照指纹图谱
峰3:龙胆苦苷 峰4:芍药苷 峰7:血竭素 峰13:蛇床子素 峰18: 11-羰基-β-乙酰乳香酸