【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸为流动相B,按表1流动相比例进行梯度洗脱;检测波长见表2。流速:1ml/min,柱温:35℃。
表1 更年宁HPLC多成分含量测定流动相比例表
时间(分钟) | 流动相(A%) | 流动相(B%) |
0~10 | 13→16 | 87→84 |
10~20 | 16→17 | 84→83 |
20~25 | 17→25 | 83→75 |
25~37 | 25→33 | 75→67 |
37~55 | 33→45 | 67→55 |
55~65 | 45→66 | 55→34 |
65~70 | 66→13 | 34→87 |
表2更年宁HPLC多成分含量测定波长切换表
时间(分钟) | 检测波长(nm) |
0~8 | 280 |
8~20 | 230 |
20~55 | 280 |
55~70 | 326 |
混合对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品、汉黄芩苷对照品、黄芩素对照品、汉黄芩素对照品、芍药苷对照品、橙皮苷对照品、丹酚酸B对照品适量,加甲醇制成每1ml含黄芩苷42μg、汉黄芩苷10μg、黄芩素3.4μg、汉黄芩素3.44μg、芍药苷40μg、橙皮苷40μg、丹酚酸B25μg的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 取更年宁适量,研细,精密称取1.2g,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,超声处理30分钟,滤过,取续滤液,以0.45µm微孔滤膜滤过,即得。
测定法 取对照品溶液及供试品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,测定,即得。
限度 本品含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计,每1g不得少于2.0mg;黄芩素和汉黄芩素的总量与黄芩苷和汉黄芩苷总量的比值为不得大于0.2;
含白芍和牡丹皮以芍药苷(C23H28O11)计,每1g不得少于0.80mg;
含陈皮以橙皮苷(C28H34O15)计,每1g不得少于0.45mg;
含丹参以丹酚酸B(C36H30O16)计,每1g不得少于0.77mg。