【含量测定】柴胡 照高效液相色谱法（中国药典2020年版通则0512）和质谱法（中国药典2020年版通则0431）测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（100mm×2.1mm×1.9μm）；以乙腈为流动相A，0.1％甲酸为流动相B，梯度洗脱（0～3分钟，A相25～30％；3～30分钟，A相30～50％；30～31分钟，A相50～90％；31～34分钟，A相90％；34～35分钟，A相90～25％；35～40分钟，A相25％）；流速：0.3ml/min；柱温：35℃；进样量：1μl。采用电喷雾离子源，负离子扫描，多反应监测（MRM）模式；质谱扫描参数见下表。

表 质谱扫描参数

*为定量离子对

对照品溶液的制备  精密称取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷d对照品适量，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a 19μg、柴胡皂苷d 19μg的混合对照溶液。

供试品溶液的制备  取本品水蜜丸适量，研碎，取约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5%浓氨试液的甲醇溶液20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率500W，频率37kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用5%浓氨试液的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。

本品含柴胡以柴胡皂苷a（C₄₂H₆₈O₁₃）和柴胡皂苷d（C₄₂H₆₈O₁₃）的总量的总量计，水蜜丸每1g含柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的总量不得少于76.68µg。