现将我院生物制品所相关科室委托技术服务项目结果公示如下：

一、项目概况

项目名称： 细胞制备与病毒改造

技术服务的内容：

1）构建敲除目标基因的细胞稳转株；利用CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理，使用电转法敲除靶细胞的目的基因，再分离培养单个细胞进行单克隆化，扩增培养后通过PCR及测序验证，获得目的基因敲除的阳性单克隆。

2）构建过表达目标基因的细胞株；用携带有抗性和报告基因的慢病毒转导目的细胞；转导后，使用特定抗生素药筛 5 天；药筛结束后，进行扩增和培养得到混合稳转细胞株。

3)制备慢病毒载体。

技术服务的方式：根据甲方项目需要提供服务支持，并出具相应的质控报告，结题报告。

采购实施部门：生检所艾滋室

二、拟成交信息

供应商名称：云舟生物科技（广州）股份有限公司

对该公司前期调研和实验验证结果表明：

1）该公司生产的目的基因过表达细胞稳转株可以克服瞬时转染的表达效果不稳定问题；过表达细胞稳转株通过慢病毒转导制备，并且经过了标准的药物筛选步骤；目的基因的表达水平使用RT-PCR测定；细胞发货前的QC检验还包括无菌测试、支原体检测。符合实验要求。

2）该公司使用CRISPR技术可以稳定地从靶细胞中敲除目的基因，即使用一对靶向目的基因的gRNA和Cas9表达载体共同导入靶细胞，从而在目的基因上造成两个切口。细胞尝试修复切口的过程将导致两个切口间的序列的大片段删除。切口在基因上的位置经过专门优化，以使基因片段被敲除后可最大程度地失活目的基因。符合实验要求。

3）与该公司的沟通交流和预实验过程中，发现其可以满足时间紧的要求，并可以根据具体需要调整制定科学的工作方案。

成交金额：按单次实际金额结算。

甲方依据当次项目计划书以及最终交付报告内具体发送的项目费用进行核对，核对无误后，双方在《对账单》上签字确认，乙方开具含税普票，甲方收到发票后30个工作日内完成本次付款。

服务项目价目表：

哺乳动物基因表达载体：瞬转质粒载体1180元起；慢病毒载体1180元起（过表达需要加上基因合成费用）。

病毒部分报价均需要增加慢病毒载体费用1180元，若是基因过表达还需增加基因合成费用1.5元*1bp。

稳转株部分报价1.过表达基因超过2500bp，还需增加2000元 2.根据细胞转导的难易程度，价格有所浮动。

四、公示期自本公告发出之日起5个工作日截止，如有意见建议或对结果有异议的，请按以下方式联系。

联系人：李颖

联系电话：53851700

纪检监督电话：53851337

中检院艾滋室

2023年12月13日