【指纹图谱】照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为10 cm,内径为2.1 mm,粒径为1.7μm);以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,检测波长为220 nm,流速为0.3 mL/min;柱温为35℃。理论板数按雷公藤春碱计算应不低于4000。
时间(min) | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
0~22 | 27→37 | 73→63 |
22~40 | 37→60 | 63→40 |
40~46 | 60→90 | 40→10 |
参照溶液的制备 精密称取雷公藤春碱对照品适量,加甲醇制成浓度为0.54 mg/mL的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品20片,精密称定,研细,取约10片的重量,精密称定,置于50 mL具塞锥形瓶中,加乙酸乙酯15 mL,称定重量,超声处理(功率300 W,频率45 kHz)30 分钟,放冷,再次称定重量,用乙酸乙酯补足减失的重量,滤过,量取续滤液5 mL,过中性氧化铝固相小柱(6 cc/1g),用15 mL乙酸乙酯洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣用甲醇溶解并定容至10 mL,混匀,过0.45 μm滤膜,即得。
测定法 分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各3μl,注入液相色谱仪,测定,记录色谱图,即得。