当归、川芎 照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统造用性试验 以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为321nm;柱温35℃,流速:1.0ml/min。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~15 | 5→12 | 95→88 |
15~25 | 12 | 88 |
25~60 | 12→25 | 88→75 |
60~65 | 25→90 | 75→10 |
65~70 | 90 | 10 |
70~75 | 95→5 | 10→95 |
75~85 | 5 | 95 |
对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量,精密称定,加70%甲醇制成每1ml含5μg 的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下本品10g,精密称定,置50ml容量瓶中,加乙醇至刻度,振摇5分钟,离心,精密量取上清液25ml,蒸干,用水20ml分次洗涤蒸发皿,转移至分液漏斗中,用乙醚振摇提取3次,每次20ml,合并乙醚液,低温蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中, 加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液与阴性样品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。