精密吸取本品1ml，置50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，充分摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液100μl，置微量进样瓶中，加胰蛋白酶溶液10μl（取序列分析用胰蛋白酶，加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml中含1mg的溶液，临用前现配），摇匀，37℃恒温酶解12小时，作为供试品溶液。另取阿胶对照药材0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液40ml，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，同法制成对照药材溶液。照高效液相色谱-质谱法（中国药典2015年版四部通则0512和0431）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱内径为2.1mm）；以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，流速为每分钟0.3ml；采用质谱检测器，电喷雾正离子模式（ESI⁺），进行多反应监测（MRM），选择质荷比（m/z）539.8（双电荷）→612.4和m/z 539.8（双电荷）→923.8作为检测离子对。取阿胶对照药材溶液，进样5μl，按上述离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于3：1。

吸取供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定。 以质荷比（m/z）539.8（双电荷）→612.4和m/z 539.8（双电荷）→923.8离子对提取的供试品离子流色谱中，应同时呈现与对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。