【检查】防腐剂照液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件及系统适应性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,以0.02mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH值3.7)为流动相B,按下表进行梯度洗脱,流速1.0ml/分钟,苯甲酸以228nm为检测波长、山梨酸和对羟基苯甲酸酯类以255nm为检测波长,柱温30℃,理论板数按苯甲酸峰计算应不低于13500。
时间 | A | B |
0 | 25 | 75 |
48 | 25 | 75 |
49 | 44 | 56 |
69 | 44 | 56 |
70 | 54 | 46 |
102 | 54 | 46 |
103 | 90 | 10 |
113 | 90 | 10 |
对照品溶液的制备取苯甲酸对照品、山梨酸钾对照品、对羟基苯甲酸甲酯对照品、对羟基苯甲酸乙酯对照品、对羟基苯甲酸丙酯对照品、对羟基苯甲酸丁酯对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含苯甲酸240μg、山梨酸钾80μg、对羟基苯甲酸甲酯10μg、对羟基苯甲酸乙酯10μg、对羟基苯甲酸丙酯10μg、对羟基苯甲酸丁酯10μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备:精密量取本品1ml,置50ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液即得。
测定法分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定苯甲酸含量;调整仪器灵敏度,使对羟基苯甲酸乙酯对照品峰高约占纵坐标的1/4,检查山梨酸和对羟基苯甲酸酯类等其他防腐剂峰是否存在并计算含量。