【检查】甜味剂照液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件及系统适应性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.02mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH值3.7)为流动相B,按下表进行梯度洗脱,安赛蜜(0~16分钟)以226nm为检测波长、5-羟甲基糠醛(16.01~28.0分钟)以284nm为检测波长、阿司帕坦等其余人造甜味剂(28分钟以后)以210nm为检测波长,柱温30℃,理论板数按阿司帕坦峰计算应不低于110000。
时间 | A | B | 流速 |
0~35 | 2→3 | 98→97 | 0.8 |
35~40 | 3 | 97 | 0.8→1.0 |
40~60 | 3→11 | 97→89 | 1.0 |
60~95 | 11 | 89 | 1.0 |
95~96 | 11→26 | 89→74 | 1.0 |
96~135 | 26 | 74 | 1.0 |
135~136 | 26→90 | 74→10 | 1.0 |
136~150 | 90 | 10 | 1.0 |
150~155 | 90→2 | 10→98 | 1.0 |
对照品溶液的制备精密称取5-羟甲基糠醛对照品、阿力甜对照品、纽甜对照品、安赛蜜对照品、糖精对照品、阿斯巴甜对照品、甜菊糖苷对照品,加50%甲醇制成每含5-羟甲基糠醛8μg、阿力甜30μg、纽甜30μg、安赛蜜100μg、糖精50μg、阿斯巴甜320、甜菊糖70μg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备:精密吸取茵栀黄口服液3ml,置10ml量瓶中,加50%甲醇使溶解至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液即得。
测定法分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定5-羟甲基糠醛和阿司帕坦含量;调整仪器灵敏度,使阿司帕坦对照品峰高约占纵坐标的1/3,检查其他人造甜味剂峰是否存在并计算含量。