【检查】蔗糖、蜂蜜、蔗果糖类照液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件及系统适应性试验以氨基键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.05%氨试液为流动相B,按下表进行梯度洗脱,流速0.8ml/分钟,柱温35℃,蒸发光散射检测器,漂移管温度60℃。理论板数按葡萄糖峰计算应不低于3000。
时间 | A | B |
0 | 75 | 25 |
32 | 75 | 25 |
32.01 | 70 | 30 |
60 | 70 | 30 |
60.01 | 75 | 25 |
70 | 75 | 25 |
对照品溶液的制备精密称取果糖对照品、葡萄糖对照品、蔗糖对照品、麦芽糖对照品、乳糖对照品、蔗果3糖对照品、蔗果4糖对照品、蔗果5糖对照品,加20%乙腈制成每含果糖和葡萄糖各0.8mg、蔗糖5.5mg、麦芽糖0.18和乳糖各0.18mg、蔗果3糖和蔗果4糖、蔗果5糖各0.15mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备:精密吸取茵栀黄口服液1ml,置25ml量瓶中,加20%乙腈使溶解至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液即得。
测定法分别精密吸取上述对照品溶液10μl和20μl、供试品溶液各20ul,各进样2次,以峰面积对数计算蔗糖、果糖和葡萄糖含量;调整仪器灵敏度,使葡萄糖对照品峰高约占纵坐标的1/3,检查麦芽糖、乳糖和蔗果3、4、5糖等人造甜味剂峰是否存在并计算含量。