茵栀黄口服液(注射液)中15种成分的含量测定和指纹图谱鉴别方法

发布时间:2020-04-08

【指纹图谱】在含量测定项下供试品图谱中,应检出17个共有峰,以栀子苷峰为参照峰,各峰的相对保留时间分别为0.54、0.83、0.90、1、1.14、1.67、1.86、2.02、2.07、2.21、2.35、2.37、2.58、2.66、2.88、3.15、3.21。

【含量测定】照液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。

色谱条件及系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:以乙腈为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,按下表梯度洗脱;柱温30℃,流速、检测波长按下表变换;理论板数按栀子苷峰计算应不低于80000。

时间(min)

A(%)

B(%)

流速

0~30

5→11

95→89

0.8

30~32

11

89

0.8→1.0

32~50

11

89

1.0

50~51

11→16

89→84

1.0

51~65

16

84

1.0

65~97

16→30

84→70

1.0

97~120

30→50

70→50

1.0

120~130

50→70

50→30

1.0

时间(min)

波长(nm)

0~37

325

37~40

238

40~60

275

60~65

228

65~85

325

85~96

274

96~105

203

105~135

274

135~150

325

 对照品溶液的制备精密称取新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸对照品、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸对照品、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸对照品、对羟基苯乙酮对照品、黄芩素对照品、野黄芩苷对照品、汉黄芩素对照品、汉黄芩苷对照品、千层纸素A对照品、栀子苷对照品、千层纸素A苷对照品、苯甲酸对照品,加50%甲醇(黄芩素对照品、野黄芩苷对照品、汉黄芩素对照品、汉黄芩苷对照品、千层纸素A可用甲醇溶解后,再用50%甲醇稀释)制成每1ml含新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、野黄芩苷和汉黄芩素各20ug,3,5-O-二咖啡酰奎宁酸和千层纸素A各6μg,对羟基苯乙酮和汉黄芩苷各4ug、黄芩素80μg、栀子苷100μg、千层纸素A苷130μg、苯甲酸160μg的溶液,即得。

供试品溶液的制备精密量取本品3ml,置50ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液。取续滤液,即得。

测定法分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。