【指纹图谱】照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,检测波长为254nm,理论板数按升麻素苷峰计算应不低于2000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~25 | 40→60 | 60→40 |
25~55 | 60→80 | 40→20 |
55~65 | 80→90 | 20→10 |
参照物溶液的制备 取升麻素苷对照品及5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品适量,精密称定,分别加甲醇制成每1ml各含60μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品细粉约0.25g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇10ml,称定重量,水浴回流2小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取上述两种对照品溶液各3μl与供试品溶液2μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
按中药色谱指纹图谱相似度评价系统,供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算,5分钟后的色谱峰,其相似度不得低于0.80。
对照指纹图谱
峰1:升麻素苷 峰2:升麻素 峰3:5-o-甲基维斯阿米醇苷
峰4:亥毛酚苷 峰5:欧前胡素 峰6、7、8未知