【含量测定】 黄连 照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.06mol/L碳酸氢铵溶液（每100ml含1.4ml浓氨水和0.3ml三乙胺）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为345nm。柱温： 30℃； 流速为1.0 mL/min；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。
时间（min） | 流动相A （%） | 流动相B （%） |
0~9 | 23 | 77 |
9~15 | 23→25 | 77→75 |
15~50 | 25→45 | 75→55 |
对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml各含100μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（100:1）的混合溶液25 ml，密塞，称定重量，超声处理（功率700 W，频率80 kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-盐酸（100:1）的混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，以盐酸小檗碱对照品的峰面积为对照，分别计算盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量，用待测成分色谱峰与盐酸小檗碱色谱峰的相对保留时间确定盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的峰位，其相对保留时间在规定值的±5%范围之内（若相对保留时间偏离超过5%，则应以相应的被替代对照品确证为准），即得。相对保留时间见下表：
待测成分（峰） | 相对保留时间 | 校正因子 |
盐酸药根碱 | 0.35 | 1.35 |
非洲防己碱 | 0.50 | 0.91 |
表小檗碱 | 0.75 | 1.17 |
盐酸黄连碱 | 0.82 | 1.08 |
盐酸巴马汀 | 0.95 | 1.00 |
盐酸小檗碱 | 1.00 | 1.00 |
本品每粒含黄连以盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的总量计，不得少于2.5mg；含盐酸小檗碱不得少于1.6mg，含盐酸巴马汀不得少于0.44mg，含盐酸黄连碱不得少于0.40mg，含表小檗碱不得少于0.20mg。
