照高效液相色谱法-质谱法（中国药典2015年版通则0512和通则0431）测定。

色谱质谱条件  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1%甲酸（含5mmol/L甲酸铵）溶液为流动相A，以乙腈（含5%水和5mmol/L甲酸铵）为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温为35℃，流速为0.4ml/min。

以三重四极杆串联质谱仪检测；离子源为电喷雾（ESI）离子源，使用正离子扫描模式。监测模式为多反应监测（MRM），山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的参考保留时间、监测离子对、碰撞电压（CE）参考值见下表。

对照品溶液的制备  取山麦冬皂苷B对照品、短葶山麦冬皂苷C对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1ml含山麦冬皂苷B 10ng、短葶山麦冬皂苷C 200ng的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品适量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）2小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心（4000转/分钟）5分钟，取上清液1ml，继续离心（14000转/分钟）5分钟，取上清液，即得。

测定法  分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各5μl，注入液相色谱-串联质谱仪，记录色谱图。

结果判断  供试品色谱中应呈现与对照品色谱保留时间相同的监测离子对，且监测离子对峰面积比一致（相对比例>50%，允许±20%偏差；相对比例>20%~50%，允许±25%偏差；相对比例>10%~20%，允许±30%偏差；相对比例≤10%，允许±50%偏差），即判定山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C检出。若供试品色谱峰峰面积大于对照品色谱峰峰面积，即判定“坤宝丸”中存在山麦冬掺伪。