【检查】山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C 照液相色谱-质谱联用法(中国药典2015年版通则0512和通则0431)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶(色谱柱内径2.1mm)为填充剂;以10mmol乙酸铵溶液为流动相A,乙腈为流动相B,按下表进行梯度洗脱,流速为0.2ml/min。
时间(min) | A | B |
0~1.5 | 55 | 45 |
1.5~8 | 55→5 | 45→95 |
采用三重四级杆质谱检测器,电喷雾离子(ESI-)负离子模式下进行多反应监测(MRM),监测离子对见下表:
筛查成分 | 母离子 | 子离子 |
山麦冬皂苷B | 721.2 | 575.3、89.1 |
短葶山麦冬皂苷C | 870.2 | 738.3、576.2 |
对照品溶液的制备 分别取山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C对照品适量,加甲醇制成每1ml各含2μg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品适量,研细,取约4g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加甲醇10ml,超声处理30分钟(300W,50kHz),放冷,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
结果判断 供试品色谱中,以m/z721.2→575.3、89.1及m/z 870.2→738.3、576.2作为检测离子对,应不得出现与山麦冬皂苷B 对照品或短葶山麦冬皂苷C对照品色谱保留时间一致的色谱峰。