【29种芳香伯胺】 照高效液相色谱-质谱法(中国药典2015年版四部通则0512和通则0431)测定。
色谱条件 色谱柱:Agilent Poroshell 120 EC-C18(150mm×3mm,粒径2.7μm)。流动相:按下表梯度洗脱;流速:0.3ml/min;柱温:40℃;进样量:1μl。
时间(min) | 甲醇(%) | 0.01%甲酸(%) |
0~1 | 10 | 90 |
1~21 | 10→90 | 90→10 |
21~25 | 90 | 10 |
25~25.1 | 90→10 | 10→90 |
25.1~35 | 10 | 90 |
质谱条件 电喷雾离子化源(ESI),正离子模式,毛细管电压2.5KV,脱溶剂温度:500℃;气流量:800(L/h),多反应监测(MRM)模式,测定参数设置见下表。
成分 | 母离子 | 子离子 | 椎孔电压 | 碰撞电压 | |
对苯二胺/间苯二胺 | 109.3 | 92.2 | 20 | 20 | |
65 | 20 | 25 | |||
2,6-二氨基甲苯/2,4二氨基甲苯 | 123.2 | 106.2 | 35 | 25 | |
108.2 | 35 | 25 | |||
对甲氧基苯胺/2-甲氧基苯胺 | 124.3 | 109.3 | 35 | 20 | |
92.2 | 35 | 22 | |||
苯胺 | 94.4 | 77.2 | 20 | 20 | |
1,5-二氨基萘 | 159.5 | 143 | 20 | 30 | |
115.2 | 20 | 30 | |||
联苯胺 | 185.3 | 168.1 | 30 | 30 | |
151.5 | 30 | 50 | |||
4,4-二氨基二苯醚 | 201.4 | 107.9 | 30 | 25 | |
80.1 | 30 | 35 | |||
4,4-二氨基二苯甲烷 | 199.4 | 106.1 | 30 | 35 | |
89.1 | 30 | 35 | |||
邻-甲基苯胺 | 108.4 | 91.1 | 40 | 20 | |
93.2 | 40 | 20 | |||
3,3-二甲氧基联苯胺 | 245.4 | 230.6 | 30 | 25 | |
214.4 | 30 | 25 | |||
3,3-二甲基联苯胺 | 213.3 | 181.1 | 40 | 30 | |
197.5 | 40 | 30 | |||
2,4-二甲基苯胺/2,6-二甲基苯胺 | 122.4 | 105.3 | 30 | 20 | |
107.3 | 30 | 20 | |||
2-甲氧基-5-甲基苯胺 | 138.4 | 123.3 | 20 | 20 | |
106.3 | 20 | 25 | |||
3,3-二甲基-4,4-二氨基二苯甲烷 | 227.6 | 120.5 | 20 | 30 | |
178.6 | 20 | 30 | |||
2,4,5-三甲基苯胺/2,4,6-三甲基苯胺 | 136.4 | 119.3 | 30 | 20 | |
121.3 | 20 | 20 | |||
4-氯苯胺 | 128.2 | 93.1 | 30 | 20 | |
111.2 | 30 | 25 | |||
4,4-二氨基二苯硫醚 | 217.4 | 123.9 | 30 | 25 | |
200.3 | 30 | 25 | |||
2-萘胺 | 144.3 | 127.2 | 30 | 30 | |
117.2 | 30 | 25 | |||
4-氯邻甲苯胺 | 142.2 | 125.3 | 30 | 30 | |
106.7 | 30 | 30 | |||
4-氨基联苯 | 170.2 | 127.2 | 40 | 50 | |
152.4 | 40 | 20 | |||
3,3-二氯联苯胺 | 253.4 | 182.1 | 20 | 40 | |
218.3 | 20 | 30 | |||
3,3-二氯-4,4-二氨基二苯甲烷 | 267.4 | 140 | 30 | 30 | |
231.8 | 30 | 30 | |||
4-氨基偶氮苯 | 198.4 | 77.1 | 20 | 20 | |
93 | 20 | 25 | |||
邻氨基偶氮甲苯 | 226.4 | 91.4 | 30 | 25 | |
121.2 | 30 | 30 |
标准曲线溶液的制备 分别称取芳香胺对照品适量,置于棕色量瓶中,用甲醇溶解并稀释成浓度约10μg/ml的单成分母液(置于4℃以下保存),再定量混合并梯度稀释为各成分浓度为5ng/ml~50ng/ml的混合标准溶液。
供试品溶液的制备 水提取 取复合膜样品100cm2,裁成2.5cm×0.2cm的细条状至250ml具塞锥形瓶中,精密加入水20ml,称定重量,置60℃下恒温加热2小时,放冷,补足减失的重量,摇匀,提取液以微孔滤膜(0.22μm)滤过,待测。
甲醇提取 取复合膜样品100cm2,裁成2.5cm×0.2cm的细条状至250ml具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,称定重量,超声处理30分钟,放冷,补足减失的重量,摇匀,提取液以微孔滤膜(0.22μm)滤过,待测。
测定法 分别精密吸取梯度标准溶液和供试品溶液各1μl,注入液相色谱-质谱联用仪,测定,从标准曲线上读出供试品溶液的浓度,计算。