【鉴别】  取本品适量，粉碎成粉末（过三号筛），取约1g（约相当于含龟甲胶、鹿角胶各0.1g的量），精密称定，置50ml容量瓶中，加水10ml，80℃加热45分钟，冷却后，再加0.5g碳酸氢铵溶液，加水至40ml，超声处理40分钟，加水至刻度，摇匀，用0.22μm的微孔滤膜滤过，取续滤液100μl，置微量进样瓶中，加胰蛋白酶溶液10μl（取序列分析用胰蛋白酶，加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml中含1mg的溶液，临用时配制），摇匀，37℃恒温酶解12小时，作为供试品溶液。另取龟甲胶对照药材、鹿角胶对照药材各0.1g，同法分别制成龟甲胶对照药材溶液和鹿角胶对照药材溶液。照高效液相色谱法-质谱法（中国药典2015年版通则0512和通则0431）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱内径2.1mm）；以0.1%甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表进梯度洗脱；流速为每分钟0.3ml。以三重四级杆串联质谱仪检测；电喷雾正离子模式（ESI⁺），多反应监测（MRM），以m/z631.3（双电荷）→546.4和m/z631.3（双电荷）→921.4作为龟甲胶的检测离子对；以m/z765.4（双电荷）→554.0和m/z765.4（双电荷）→733.0作为鹿角胶的检测离子对。分别取龟甲胶对照药材溶液、鹿角胶对照药材溶液，各进样5μl，按上述检测离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于3︰1。

吸取供试品溶液5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定。以m/z631.3（双电荷）→546.4和m/z631.3（双电荷）→921.4离子对提取的供试品离子流色谱图中，应同时呈现与龟甲胶对照药材色谱保留时间一致的色谱峰；以m/z765.4（双电荷）→554.0和m/z765.4（双电荷）→733.0离子对提取的供试品离子流色谱图中，应同时呈现与鹿角胶对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。

【检查】  牛皮源成分、驴皮源成分、马皮源成分、猪皮源成分  照高效液相色谱法-质谱法（中国药典2015年版通则0512和通则0431）试验。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱内径2.1mm）；以0.1%甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱：0～5分钟，A 95%，B 5%；5～10分钟，A 95%→80%，B 5%→20%；10～12分钟，A 80%→50%，B 20%→50%。流速为每分钟0.25ml；柱温为40℃。以三重四级杆串联质谱仪检测；电喷雾离子源：ESI⁺，多反应监测（MRM），以m/z 641.3（双电荷）→726.2和m/z 641.3（双电荷）→783.3作为牛皮源成分的检测离子对；以m/z 539.8（双电荷）→612.4和m/z 539.8（双电荷）→924.5作为驴皮源成分的检测离子对；以m/z 386.4（双电荷）→377.3和m/z 386.4（双电荷）→322.3作为马皮源成分的检测离子对；以m/z 774.5（双电荷）→977.8和m/z 774.5（双电荷）→1034.6作为猪皮源成分的检测离子对。

对照药材溶液的制备  取黄明胶对照药材、阿胶对照药材、马皮胶工作对照药材和新阿胶对照药材各0.1g，精密称定，分别置50ml容量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液至40ml，超声处理30分钟，加水至刻度，摇匀，用0.22 μm的微孔滤膜滤过，取续滤液100μl，置微量进样瓶中，加胰蛋白酶溶液10μl（取序列分析用胰蛋白酶，加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml中含1mg的溶液，临用时配制），摇匀，37℃恒温酶解12小时，作为对照药材溶液。制成黄明胶对照药材溶液、阿胶对照药材溶液、马皮胶药材溶液和新阿胶胶对照药材溶液。

供试品溶液的制备  取〔鉴别〕项下的供试品溶液，即得。

测定法  分别吸取供试品溶液及上述四种对照药材溶液各 5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。