【指纹图谱】 照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.3%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;多波长切换,0~20分钟检测波长为270nm,20~42分钟检测波长为240nm,42~75分钟检测波长为270nm;柱温为30℃;流速为每分钟0.8ml。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~60 | 2→25 | 98→75 |
60~75 | 25→50 | 75→50 |
对照品溶液的制备 取没食子酸、莫诺苷、绿原酸、马钱苷、金丝桃苷、山茱萸新苷Ⅰ、槲皮素、山柰酚对照品适量,加甲醇分别制成每1mL含没食子酸25μg、莫诺苷25μg、绿原酸25μg、马钱苷20μg、金丝桃苷25μg、山茱萸新苷Ⅰ10μg、槲皮素1μg、山柰酚1μg的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 取本品细粉1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%的乙醇溶液25ml,称定重量,加热回流60分钟,放冷,再称定重量,用50%的乙醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
供试品指纹图谱中应分别呈现与参照物色谱峰保留时间相对应的色谱峰,并应出现14个共有峰。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度应不得低于0.90。
指纹图谱
对照指纹图谱
14个共有峰中峰1:没食子酸 峰7:莫诺苷(S) 峰8:绿原酸 峰9:马钱苷 峰11:金丝桃(S)
峰12:山茱萸新苷Ⅰ 峰13:槲皮素 峰14:山奈酚