照高效液相色谱-质谱法（中国药典 2015 年版四部通则0512和通则0431）测定
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.1％甲酸为流动相B，梯度洗脱，0～10分钟，A相15～25％；10～20分钟，A相25～50％；20～30分钟，A相50～25％；30～40分钟，A相25～15％ ；流速：0.3ml/min；柱温：35℃。
采用三重四极杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI）负离子模式，扫描模式为选择反应检测模式（SRM），具体参数设置见表4。
表4 质谱参数
# | 扫描类型 | 筛查成分 | 监测离子 | Collision Energy | 监测模式 |
1 | SRM | 柴胡皂苷k | 943.5[M-H]- | 45V | Negative |
藏柴胡参比溶液的制备
取藏柴胡对照药材0.3g、北柴胡对照药材2.7g，精密称定，置烧杯中，加水约150ml，煎煮2次，每次1.5小时，离心，上清液合并，浓缩至适量，置25ml容量瓶中，加入含5%浓氨试液的甲醇溶液定容，密塞，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
对照品溶液的配制
取柴胡皂苷k对照品适量，加甲醇制成每1ml含12.64μg/ml的溶液，过0.22μm的滤膜，即得。
供试品溶液的制备
精密量取10ml样品，加甲醇25ml，离心，取上清液，过0.22μm的滤膜，即得。
测定法 分别吸取藏柴胡参比溶液和对照品溶液与供试品溶液各 3μl， 注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。
结果判定 供试品的提取离子流色谱中，同时出现与参比溶液色谱离子质荷比m/z943.5→635.4、m/z943.5→797.5和m/z943.5→781.5的SRM色谱图中柴胡皂苷k保留时间相同的色谱峰，且供试品色谱中m/z943.5→635.4 的 SRM 色谱图中柴胡皂苷k色谱峰面积值大于参比溶液中相应的峰面积值者，视为检出
