照高效液相色谱法(中国药典 2015 年版四部通则0512)测定
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.02mol/L乙酸铵的0.2%磷酸溶液为流动相B,按表2流动相比例进行梯度洗脱;检测波长为230nm、255nm。流速:1.0ml/min,柱温:40℃。理论塔板数按苯甲酸峰计算应不低于3000。
表2 流动相比例表
时间(分钟) | 流动相(A%) | 流动相(B%) |
0~35 | 10 | 90 |
35~50 | 10→38 | 90→62 |
50~75 | 38 | 6 |
对照品溶液的制备 取苯甲酸、山梨酸对照品适量,精密称定,加水制成每1ml各含60μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 精密量取乳核内消液1ml,置50ml量瓶中,加甲醇适量,超声处理5分钟,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。