【检查】山银花

（1）取金芪降糖片1片，除去包衣，研细（或取金芪降糖胶囊装量差异项下内容物，约1.2g），加甲醇20ml，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇溶液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取山银花对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；再取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验，吸取上述三种溶液2~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（6:4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同的颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱-质谱联用方法验证。

（2）照高效液相色谱（中国药典2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.4%乙酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器检测；理论板数以灰毡毛忍冬皂苷乙计算应不低于5000。进样量10μl。

对照品溶液的制备  灰毡毛忍冬皂苷乙对照品加甲醇制成每1ml含0.2 mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取检查项下供试品溶液，用微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液，即得。

测定法  吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5~10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

供试品色谱图中，在与对照品色谱峰保留时间相对应的色谱峰，若出现相对应的色谱峰，则用下列高效液相色谱-质谱联用方法验证。

（3）照高效液相色谱-质谱法（中国药典2015年版四部通则0512和0431）测定。

色谱条件： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%乙酸溶液（28:72）为流动相，流速为0.3mL/min；柱温为35℃。

质谱参数：电喷雾离子源（ESI），负离子检测，采取一级全扫描及二级全扫描方式，质量范围500~1500。

对照品溶液的制备与测定  灰毡毛忍冬皂苷乙加甲醇制成每1ml含800ng的溶液，取5μl注入液质联用仪，进行液质联用分析，记录一级质谱图和二级质谱图。

供试品溶液的制备与测定  取检查项下供试品溶液，稀释后用微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液，即得。取5μl注入液质联用仪，进行液质联用分析，记录一级质谱图和二级质谱图。

供试品色谱中，应不得检出与对照品保留时间相同的色谱峰；若检出保留时间相同的色谱峰，色谱峰的一级质谱及二级质谱均不得与对照品一致。