检验方法：

（2）高效液相色谱-质谱法测定当归养血丸中阿胶特征多肽的含量

【含量测定】阿胶  照《中国药典》2015年版四部高效液相色谱-质谱法（通则 0512 和通则 0431） 测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱内径为2.1mm）；以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，流速为每分钟0.3m1。

采用三重四级杆质谱检测器，电喷雾正离子模式（ESI）正离子模式下多反应监测（MRM），监测离子对见表：

理论板数按驴源多肽A₁峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备 取驴源多肽A₁对照品和驴源多肽A₂对照品适量，精密称定，加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml各含2.5μg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品粉末约1.70g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入1%碳酸氢铵溶液25ml，称定重量，超声处理60分钟，再称定重量，用1%碳酸氢铵溶液补足减失的重量，离心（3500转/分钟）5分钟，将上清液转移至另一离心管中，再离心（3500转/分钟）5分钟，取上清液，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，再用0.22μm微孔滤膜滤过，精密量取续滤液1ml，置5ml量瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析级胰蛋白酶，加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml含1mg的溶液，临用新配）1ml，加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，摇匀，37℃恒温酶解12小时，滤过，取续滤液，即得。

测定法  精密量取对照品溶液1、2、5、10、20、25ml，分别置50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，摇匀，制成标准曲线溶液。分别精密吸取不同浓度的标准曲线溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，以对照品峰面积为纵坐标，对照品浓度为横坐标制备标准曲线。从标准曲线读出供试品溶液中驴源多肽A₁和驴源多肽A₂的浓度，计算，即得。

量浓度0模式下，，1704本品每1g含阿胶以驴源多肽A₁和驴源多肽A₂的总量计，不得少于78μg。