1.半夏止咳糖浆中甘草和陈皮高效液相色谱含量测定方法
色谱条件与系统使用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,检测波长甘草苷、甘草酸237nm,橙皮苷283nm,柱温为30℃,流速为0.5ml/min。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于10000。梯度洗脱程序如下:
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~10 | 5 | 95 |
10~25 | 5→8 | 95→92 |
25~52 | 8→30 | 92→70 |
52~65 | 30→50 | 70→50 |
65~70 | 50 | 50 |
70~80 | 50→90 | 50→10 |
80~85 | 90→5 | 10→95 |
80~85 | 5 | 95 |
对照品溶液的制备:取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品和橙皮苷对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1ml含甘草苷8μg、甘草酸铵48μg、橙皮苷20μg的混合溶液,作为混合对照品溶液,即得。
供试品溶液的制备:精密量取供试品10ml,置25ml量瓶中,精密加入50%乙醇,稀释至刻度,摇匀,用0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液,测定,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
2.半夏止咳糖浆中麻黄高效液相色谱含量测定方法
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钾水溶液(含0.1%磷酸及0.1%三乙胺)为流动相,柱温为25℃,检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备:分别精密称取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱适量,加5%氨水甲醇制成每1ml中分别含110、100μg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备:精密量取本品25ml,置50ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸稀释至刻度,摇匀,精密量取3ml,加于已处理好的混合型阳离子交换小柱上(500mg,依次用甲醇、水、0.1mol/L盐酸各10ml洗脱),用甲醇5ml洗脱,弃去洗脱液,再用5%氨水甲醇溶液洗脱至10ml量瓶中,加5%氨水甲醇溶液至刻度,摇匀,用0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别取上述对照品溶液5μl和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
3.半夏止咳糖浆中苦杏仁高效液相色谱含量测定方法
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水(15:85)为流动相,柱温为40℃,检测波长为210nm。理论板数按苦杏仁苷峰计算应不低于500
对照品溶液的制备:取苦杏仁苷对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含0.18mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备:精密量取本品10ml,置50ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,离心(3000r/min),取上清液,用0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
4.半夏止咳糖浆中品种防腐剂含量测定方法
色谱条件与系统使用性试验 :以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇为流动相A,以0.05mol/L醋酸铵溶液(冰醋酸调节pH至4
.0)为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,检测波长苯甲酸为233nm、其余255nm,柱温为40℃,流速为1.0ml/min。理论板数按苯甲酸峰计算应不低10000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~30 | 20→45 | 80→55 |
30~50 | 45→80 | 55→20 |
50.1 | 20 | 80 |
60 | 20 | 80 |
对照品溶液的制备:对照品溶液的制备:分别精密称取苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯适量,加50%甲醇制成每1ml分别含80、10、20、20、20、20μg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备:精密量取本品5ml,置100ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。