利福昔明胶囊有关物质、溶出度及水分检验方法

发布时间:2019-05-16

有关物质取装量差异项下的内容物适量(约相当于利福昔明50mg),精密称定,置100ml量瓶中,加乙腈-水(4:6)适量,超声使利福昔明溶解,放冷,用乙腈-水(4:6)稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液;精密量取适量,用乙腈-水(4:6)定量稀释制成每1ml中含5μg的溶液,作为对照溶液。精密量取适量,用乙腈-水(4:6)定量稀释制成每1ml中含0.1μg的溶液,作为灵敏度溶液。照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)试验,用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Phenomenex Synergi Polar-RP,4.6×250mm,4μm或效能相当的色谱柱);以3.16g/L甲酸铵溶液(pH7.2)-甲醇-乙腈(43:22:35)为流动相A,甲醇为流动相B,乙腈为流动相C,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟1.0ml;检测波长为254nm;柱温为30。取利福昔明、2-氨基-4-甲基吡啶、利福霉素S、利福霉素O、杂质A和杂质B各适量,加稀释剂溶解并稀释制成每1ml中分别含利福昔明0.5mg、2-氨基-4-甲基吡啶、利福霉素S、利福霉素O、杂质A和杂质B各约5μg的混合溶液,作为系统适用性溶液1;取利福霉素B和利福霉素SV各适量,加稀释剂溶解并稀释制成每1ml中各含5μg的溶液,作为系统适用性溶液2。分别取上述两种系统适用性溶液20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,各杂质之间及利福昔明与相邻杂质间的分离度均应符合要求。取灵敏度溶液20μl注入液相色谱仪,主成分色谱峰的信噪比应大于10。精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰,相对保留时间为0.70的杂质不得过0.5%,相对保留时间为0.83的杂质不得过0.1%,其他单个杂质不得过0.2%,杂质总量不得过2.0%。

时间

(min)

流动A

%

流动B

%

流动相C

%

0

100

0

0

40

100

0

0

60

5

35

60

70

5

35

60

71

100

0

0

81

100

0

0

溶出度:取本品,照溶出度测定法(中国药典2015年版四部通则0931 第二法),以含0.45%十二烷基硫酸钠的pH7.4磷酸钠盐缓冲液为溶剂,溶出介质体积为1000ml,转速为每分钟75转,依法操作,45分钟时,取溶液适量,滤过,精密量取续滤液适量,用上述溶剂稀释成每1ml中约含20µg的溶液。另取利福昔明对照品适量,精密称定,用上述溶剂稀释成每1ml中约含20µg的溶液。取上述两种溶液,照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401),在448nm波长处分别测定吸收度,按二者吸收度的比值计算每片的溶出量,限度为标示量的75%,应符合规定。

水分:取本品,照水分测定法(中国药典2015年版通则0832第一法 1)测定,含水分不得过7.0%。