【含量测定】:照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以含0.1%磷酸的水溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,检测波长:254nm,流速为1mL·min-1;柱温为25℃。理论板数按大黄素峰计均应不低于3000。
时间(min) | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
0~60 | 20→80 | 80→20 |
对照品溶液的制备:分别取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、欧前胡素和异欧前胡素对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每lml含芦荟大黄素4µg、大黄酸8µg、大黄素4µg、大黄酚8µg,大黄素甲醚4µg、和欧前胡素4µg异欧前胡素4µg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备:取本品重量差异项下大蜜丸,剪碎,精密称定,取约1.5g;取水丸或水蜜丸适量,研碎;取上清片10片,除去糖衣,研细,取约1片重;取上清胶囊装量差异项下内容物,约0.175g,精密称定,研细,取约1.0g,置具塞三角锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,称定重量,加热回流45分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液10µl与供试品溶液5~20µl,注入液相色谱仪,测定,即得。