注射用三磷酸胞苷二钠有关物质项目检验方法

发布时间:2019-05-16

有关物质:照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.02mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠3.58g,磷酸二氢钾1.36g,加水900ml溶解,用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0,加入四丁基溴化铵1g,加水至1000ml,摇匀)为流动相,检测波长为270nm。取供试品溶液2ml,水浴加热1小时,作为系统适用性溶液,精密量取20μl,注入液相色谱仪,出峰次序依次为一磷酸胞苷、二磷酸胞苷、三磷酸胞苷。理论板数按三磷酸胞苷峰计算不低于3000,三磷酸胞苷峰与二磷酸胞苷峰及与其峰后相邻色谱峰之间的分离度均应大于2.0。

取本品1瓶,按标示量加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液,作为供试品溶液,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图至供试品主峰保留时间的2倍。按公式(1)和公式(2)分别计算,除一磷酸胞苷钠和二磷酸胞苷二钠外,其他杂质总量不得过2.0%;有关物质总量包括一磷酸胞苷钠、二磷酸胞苷二钠及其他杂质,不得过10.0%。


1.jpg(1)


2.jpg(2)

式中:T1— 一磷酸胞苷钠的峰面积

T2— 二磷酸胞苷二钠的峰面积

T3— 三磷酸胞苷二钠的峰面积

Tx— 其他物质的峰面积之和

0.655为一磷酸胞苷钠与三磷酸胞苷二钠分子量的比值

0.848为二磷酸胞苷二钠与三磷酸胞苷二钠分子量的比值