脑乐静口服液赭曲霉毒素A残留量测定方法

发布时间:2019-05-16

赭曲霉毒素A照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以2%的醋酸水溶液为流动相B,按下表进行梯度洗脱;用荧光射检测器检测,激发波长λex=333nm,发射波长λem=477nm。理论板数按赭曲霉毒素A峰计算应不低于2000。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0~36

35→53

65→47

对照品溶液的制备精密量取赭曲霉毒素A标准品溶液适量,加甲醇制成每1ml含5ng的溶液,即得。

供试品溶液的制备精密量取本品5ml,置于容量瓶中,加入80%甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,离心10分钟(4000rpm),精密量取上清液15ml,置50ml量瓶中,用含有2.5%NaCl及0.5%NaHCO3的盐溶液(冲洗液)定容至刻度,摇匀(必要时用玻璃纤维滤纸过滤)。精密量取溶液10ml,通过赭曲霉毒素A免疫亲和柱,流速每分钟3ml,分别用冲洗液及水各10ml洗脱,洗脱液弃去,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用1.5ml甲醇洗脱,收集洗脱液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品每1L脑乐静口服液含赭曲霉毒素A不得过15μg。