【含量测定】:照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验:Waters CORTECS TMC18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm);柱温35℃;流动相A为乙腈;B为0.1%甲酸溶液,按下表进行梯度洗脱;流速0.5 mL·min-1;甘草酸检测波长250nm,甘草苷、甘草素检测波长275nm,芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮B和异甘草素检测波长360nm。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~5 | 3→18 | 97→82 |
5~35 | 18→50 | 82→50 |
35~45 | 50→70 | 50→30 |
45~55 | 3 | 97 |
对照品溶液的制备:精密称取甘草酸、甘草苷、甘草素、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮B和异甘草素适量,加50%甲醇制成每1mL含甘草酸180µg、甘草苷15µg甘草素10µg、芹糖异甘草苷15µg、异甘草苷10µg、甘草查尔酮B 10µg和异甘草素10µg的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备:精密量取本品1ml,置25ml量瓶中,用50%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,分别计算甘草酸、甘草苷及黄酮总量(甘草苷、甘草素、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮B和异甘草素),即得。
本品每支含甘草酸不得少于39.0mg,甘草苷不得少于2.8mg,黄酮总量不得少于6.6mg。