【检查】香芹酮限量

（1）取本品2g，加水200ml，并在挥发油测定器中加入乙酸乙酯2ml，照挥发油测定法（中国药典2015年版四部通则0502）保持微沸2小时，分取乙酸乙酯液（或取含量测定项下的挥发油，用乙酸乙酯稀释至每1ml含有原药材1g的溶液），作为供试品溶液。另取薄荷对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取香芹酮对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－乙酸乙酯（19 :1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液，在80℃加热斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的主斑点；在与对照品色谱相应位置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。若大于对照品的斑点，则用下列气相色谱法验证。

（2）照气相色谱法（中国药典2015年版四部通则0521）测定。

色谱条件与系统适用性试验色谱柱：5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷固定相的毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）；FID检测器，温度300℃；进样口温度200℃；分流进样，分流比10:1；柱温：程序升温（见下表）

升温速率（℃/分钟）	柱箱温度（℃）	保持时间（分钟））
	70	4
1.5	120	0
3	200	0
30	230	2

对照品溶液的制备：取香芹酮对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含50µg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取（1）项下的供试品溶液，用乙酸乙酯稀释至每1ml含有原药材0.25g，作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取对照品溶液与及供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。

结果判定供试品色谱中与香芹酮对照品保留时间相同的色谱峰面积不得超过对照品溶液50µg/ml的峰面积；如超过，应用气相色谱-质谱联用法确证。

（3）照气相色谱-质谱法（中国药典2015年版四部通则0521和通则0431）测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验：以5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；柱温为程序升温（见下表）；进样口温度200℃；分流进样：10:1；以质谱作为检测器；离子源为电子轰击源（EI）；全扫描方式，扫描范围：20～1000m/z。

升温速率（℃/分钟）	柱箱温度（℃）	保持时间（分钟））
	70	4
1.5	120	0
3	200	0
30	230	2

对照品溶液的制备取香芹酮对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含50μg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备:取（1）项下的供试品溶液作为供试品溶液，用乙酸乙酯稀释为与对照品浓度一致的溶液。

测定法:分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液1μl，注入气相色谱-质谱联用仪，记录色谱图。

结果判断:比较对照品溶液及供试品溶液的质谱，以确证供试品中是否掺入了香芹酮。

附注：

1、气相色谱法检查参考图谱

香芹酮对照品气相色谱图

2、香芹酮的GC/MS特征离子峰

检测成分	扫描方式	主要碎片
香芹酮	正离子	39,54,82,93,108

3、香芹酮的结构信息

中文名称：香芹酮英文名称：CarvoneCAS登记号：99-49-0，分子式: C₁₀H₁₄O，分子量: 150.22，结构式：