盐酸金霉素眼膏中有关物质检验方法

发布时间:2019-05-16

【检査】有关物质临用新制。取本品约1.25g(相当于盐酸金霉素12.5mg),精密称定,置离心管中,加石油醚(沸程90~120)30ml,涡旋振荡使基质溶解,再精密加入0.01mol/L盐酸溶液50ml,涡旋振荡15分钟,静置分层,取水层,滤过,取续滤液作为供试品溶液;另取盐酸四环素对照品和4-差向金霉素对照品各适量,精密称定,加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中分别含0.02mg与0. 015mg的溶液,作为对照品溶液。取盐酸四环素对照品适量,精密称定,加0.01 mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1 ml中含0.25μg的溶液,作为对照品溶液(2)。照高效液相色谱法(通则0512)测定,用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相A 为高氯酸-二甲基亚砜-水(16:934:525),流动相B为甲醇,流动相C为乙腈,柱温为45;按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟0.8ml,检测波长为280nm。精密量取供试品溶液、对照品溶液与对照品溶液(2)各20μl ,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰,按外标法以峰面积计算,含4-差向金霉素不得过标示量的6.0% ,含盐酸四环素不得过标示量的8.0% ,其他杂质总量按外标法以4-差向金霉素计算,不得过标示量的1.5%。供试品溶液色谱图中小于对照品溶液(2)主峰面积的峰忽略不计。

时间(分钟)

流动相A%

流动相B%

流动相C%

0

95

5

0

15

95

5

0

28

70

30

0

40

50

10

40

42

95

5

0

50

95

5

0