【检查】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.4%醋酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;蒸发光散射检测器检测;理论塔板数按灰毡毛忍冬皂苷乙峰计算应不低于3000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~10 | 11.5→15 | 88.5→85 |
10~12 | 15→29 | 85→71 |
12~18 | 29→33 | 71→67 |
18~30 | 33→45 | 67→55 |
对照品溶液的制备取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含0.10mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备精密量取本品5ml,置10ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,静置1小时后滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品中应不得检出与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品保留时间相一致的色谱峰,如检出与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品保留时间相一致的色谱峰,则供试品溶液中色谱峰的峰面积不得大于对照品中色谱峰的峰面积。