肠多糖片生物学活性检验方法

发布时间:2019-05-15

【检查】

生物学活性  标准曲线溶液的制备取肝素对照品适量,用水定量稀释制成每1ml中含0.04IU、0.2 IU、0.4 IU、0.48 IU、0.72 IU的溶液,作为标准曲线溶液。

供试品溶液的制备取肠多糖片,研细,精密称取适量,用水溶解并定量稀释至每1ml含肠多糖1mg的溶液,作为供试品溶液。

测定法将已加好小钢珠的空白血凝杯放入血凝仪的反应槽中,分别精密加入标准曲线溶液和供试品溶液各50μl,再依次精密加入人血浆试液(临用前取1瓶人血浆冻干品,加水1.0ml溶解)和激活的部分凝血活酶(APTT)试剂各50μl,37℃保温2分钟,加已预热至37℃的0.025mol/L氯化钙溶液50μl,记录凝固时间。以肝素标准曲线溶液的浓度(IU/ml)与相应凝固时间(秒)的对数作直线回归,求得直线回归方程。根据回归方程计算供试品溶液的抗凝活性,每1mg肠多糖的活性应为3.2IU~4.8IU。