1.实验材料
1.1培养基
胰酪大豆胨琼脂培养基(批号：3304023)，沙氏葡萄糖琼脂培养基(批号：3105708、1611293)，胰酪大豆胨液体培养基(批号： 3304003)，沙氏葡萄糖液体培养基(批号： 3106032)。
以上培养基的适用性检查均符合规定。
1.2测定用菌株：
大肠埃希菌(Escherichia coli) [CMCC(B)44 102]
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC(B)26 003]
铜绿假单胞菌(Pseudomona aeruginosa) [CMCC(B)10 104]
白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98 001]
黑曲霉(Aspergillus niger) [CMCC(F)98 003]
以上菌种的冻干菌均购自中国食品药品检定研究院
2.实验方法
2.1 菌液制备
2.1.1大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌，分别接种至胰酪大豆胨液体培养基，30~35℃培养18～24小时，作为新鲜培养物；分别取新鲜培养物，用离心法收集菌体，将胰酪大豆胨液体培养基去除，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数约为108cfu的菌悬液。
2.1.2白色念珠菌
取白色念珠菌，接种至沙氏葡萄糖液体培养基，20~25℃培养24～48小时，作为新鲜培养物；取新鲜培养物，用离心法收集菌体，制成每1ml含菌数约为108cfu的菌悬液。
2.1.3黑曲霉
取黑曲霉，接种至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基， 20~25℃培养5~7天，加入3~5ml 0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，作为孢子悬液。吸取孢子悬液至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子量约为108cfu的黑曲霉孢子悬液。
2.2 抑菌剂效力测定试验
2.2.1 供试品接种
每批样品取包装完整的供试品5份，样品装量为10ml（体积大于10ml的样品分装），直接接种试验菌液0.1ml，每一容器接种一种试验菌液，混匀。
将接种的供试品在试验期间置20~25℃，避光保存，防止污染。
2.2.2菌液组
取1ml试验菌液，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液逐步稀释成适宜稀释级，然后各吸取1ml注入平皿中，立即倾注相应琼脂，待凝，培养。
2.2.3存活菌数测定
分别于14天和28天各取已加入试验菌的供试品，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释成适宜的稀释级，采用平皿法测定每份供试品中所含的菌数。
2.3.4计数与结果
细菌计数选取平均菌落数小于300cfu的稀释级，霉菌及酵母菌计数选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告规则报告菌数。
