【检查】盐酸巴马汀（1）取大败毒胶囊内容物约2g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另分别取黄柏和关黄柏对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸巴马汀和盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml各含0.05mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验，吸取上述四种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，应不得检出与盐酸巴马汀显相同颜色的黄色荧光斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。

（2）照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（46：54）（每100ml中加十二烷基磺酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值为4.0）为流动相；检测波长为345nm。理论板数按盐酸巴马汀峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

结果判断供试品色谱中，应不得检出与盐酸巴马汀对照品保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。

（3）照高效液相色谱-质谱联用法（中国药典2015年版四部通则0431）测定。

色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.025mol/L醋酸铵水溶液（70：30）为流动相。

质谱条件电喷雾离子化源（ESI）；毛细管温度350℃；氮气流速：每分钟9L；正离子检测；多反应监测（MRM）扫描模式。

对照品溶液的制备取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取大败毒胶囊内容物约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2µl，注入液相-质谱联用仪，测定，即得。

结果判断供试品色谱中，应不得检出与盐酸巴马汀对照品保留时间相同的色谱峰。

表1.盐酸巴马汀多反应监测（MRM）质谱参数表