含量测定照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以pH3.4缓冲液（取庚烷磺酸钠一水合物8.7g和无水硫酸钠32g，加水溶解并稀释至2000ml，用冰醋酸调节pH值至3.4±0.1）-甲醇（74：26）为流动相，流速为1.0 ml/min，柱温为35℃，采用柱后衍生化-荧光检测，激发波长为340nm，发射波长为455nm；衍生化试剂[取邻苯二醛0.8g、甲醇300ml、2-硫基乙醇2ml和硼酸盐缓冲液（称取硼酸72.0g和氢氧化钠43.0g，加水溶解并稀释至4000ml，用1mol/L硼酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至10.4±0.1）700ml，混匀，用0.45μm滤膜过滤]的流速为0.3ml/min。精密称取卡那霉素对照品约36mg和卡那霉素B对照品约5mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液。精密量取系统适用性溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，卡那霉素峰和卡那霉素B峰之间的分离度应不小于7.0，卡那霉素峰与前相邻杂质峰之间的分离度应符合要求，卡那霉素峰的拖尾因子应不大于2.0。

测定法取本品适量，精密称定，用水定量稀释制成每1ml中约含卡那霉素0.5mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取5μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取卡那霉素对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

附：系统适用性溶液的典型色谱图

色谱柱：Zorbax Eclipse plus C18,250px×11.5px,3.5μm

1、卡那霉素；2、卡那霉素B