银翘解毒合剂检验方法(3):银翘解毒合剂中多成分含量测定方法

发布时间:2018-04-25

照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Shim-pack XR-ODS柱,3.0×100mm,2.2μm);以乙腈为流动相A,以0.05%磷酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,梯度洗脱程序见下表。

梯度洗脱程序

t(min)

A(%)

B(%)

0~5

5~10

95~90

5~12

10~20

90~80

12~18

20~40

80~60

18~20

40~80

60~20

流速1mL/min,柱温35℃,PDA检测器,甘草酸铵检测波长为250nm,连翘苷、牛蒡苷、甘草苷检测波长为278nm,连翘酯苷A及酚酸类成分检测波长为328nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取连翘酯苷A、连翘苷、牛蒡苷、甘草酸铵、甘草苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C等对照品各适量,分别精密称定,用50%甲醇制成浓度分别为0.2mg/mL、0.1mg/mL、0.45mg/mL、0.2mg/mL、0.004mg/mL、0.45mg/mL、0.45mg/mL、0.5mg/mL、0.2mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL的混合溶液,摇匀,即得。

标准曲线的制备精密量取上述混合对照品溶液适量,用50%甲醇稀释制成系列对照品溶液;按前述色谱条件进样测定,记录峰面积,以对照品的浓度为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线。

供试品溶液的制备精密量取本品1mL,置10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。

测定法精密吸取供试品溶液5μL,注入液相色谱仪,测定,记录峰面积,因供试品溶液中各成分的含量差异较大,故须代入线性方程进行计算。